小鼠胚胎成纤维细胞的转染与阳性细胞的初步筛选

• 作者: 倪雪岩 姜秋 孙宏晨 聂代邦
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 白血病抑制因子 成纤维细胞 转染 小鼠
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 990-993
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 语种: 中文

摘要

目的:建立表达白血病抑制因子(LIF)的胚胎成纤维细胞的方法体系,为建立转基因动物模型提供理论依据.方法:以13.5 d ICR小鼠胚胎为材料,采用胰酶消化方法,培养小鼠原代胚胎成纤维细胞.利用脂质体介导方法,将线性化的pcDNA3.1-LIF真核表达载体转染至小鼠胚胎成纤维细胞中.经G418筛选阳性细胞,提取阳性细胞的基因组DNA并测序.结果:通过对小鼠原代胚胎成纤维细胞的分离、培养,获得原代胚胎成纤维细胞.经过转染,建立了表达LIF的胚胎成纤维细胞,并在倒置显微镜下观察到筛选得到的阳性细胞.对阳性细胞克隆质粒测序表明同源性达99%.结论:pcDNA3.1-LIF真核表达载体成功转染到小鼠胚胎成纤维细胞中.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙宏晨	吉林大学口腔医院儿童口腔科	194	754	13.0	16.0
2	姜秋	吉林大学口腔医院儿童口腔科	25	69	4.0	8.0
3	倪雪岩	首都医科大学附属北京安贞医院口腔医疗中心	7	30	4.0	5.0
4	聂代邦	吉林大学畜牧兽医学院生物技术系	6	8	1.0	2.0