应用噬菌体表面展示技术筛选丙型肝炎病毒NS5A抗原模拟表位

• 作者: 张玲霞 成军 李莉 洪源 王刚 王琳 钟彦伟 陈新华 陈菊梅
• 来源期刊: 世界华人消化杂志
• 学科: 医学
• 年，卷（期）: 2002,（2）
• 所属期刊栏目: 病毒性肝炎
• 页码范围: 133-136
• 页数: 4页
• 分类号: R511
• 字数: 4192字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-3079.2002.02.003

摘要

目的:筛选丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白NS5A(HCVNS5-A)特异性噬菌体模拟表位,为抗HCV的疫苗研究探索新途径. 方法:应用噬菌体表面展示技术,以抗-HCV NS5A的单克隆抗体作为固相筛选分子,对人工合成的噬菌体随机12肽库进行5轮"吸附-洗脱-扩增"的筛选过程,随机挑取30个克隆,经噬菌体酶联免疫吸附法(ELISA)鉴定并进行交叉反应实验以及竞争抑制性结合实验,最后对所选克隆进行DNA序列分析,以确定HCV NS5A抗原的模拟表位. 结果:经噬菌体富集后,从随机筛选的30个克隆中得到12个阳性克隆,确定氨基酸序列XXXPXXXLLRXX为HCV NS5A的模拟表位. 结论:用噬菌体12肽库成功筛选得到HCV NS5A的模拟表位,为开展用HCV模拟表位探索HCV的防治研究创造了条件.