毕赤氏酵母SMD1168/HuIFNα-2b分泌型表达的研究

• 作者: 周鹏 梁国栋 沈文涛 郭安平 黎小瑛
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 毕赤氏酵母SMD1168 α-2b干扰素 分泌型表达
• 年，卷（期）: 2003,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 287-291
• 页数: 5页
• 分类号: Q815
• 字数: 3255字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8915.2003.05.005

摘要

利用毕赤氏酵母SMD1168构建huIFNα-2b分泌型高效表达工程菌株,以提高huIFNα-2b表达量和生物比活性,增强临床治疗效果和降低临床应用的毒性副作用.将克隆修饰的huIFNα-2b基因插入pGAPZα-A之GAP启动子下游位点,构建成含α-factor信号肽的重组表达载体,转入毕赤氏酵母(Pichia pastoris)SMD1168,构建成分泌型表达huIFNα-2b的酵母工程菌株.SDS-PAGE分析表明,该工程菌株huIFNα-2b表达量占菌体分泌总量的50%以上,表达量为100～120μg/ml;MTT法测定纯化样品的生物比活性为6.69×108IU/mg蛋白～1.11×109IU/mg蛋白,并通过柱层析分离纯化了huIFNα-2b,纯度达99.7%,回收率达15%～20%;Western blotting分析表明表达的huIFNα-2b具有与天然huIFNα-2b相同的免疫原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭安平	中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室	81	763	15.0	23.0
2	周鹏	中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室	129	1451	21.0	32.0
3	黎小瑛	中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室	36	352	8.0	18.0
4	沈文涛	中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室	66	524	11.0	20.0
5	梁国栋		4	19	2.0	4.0