含EBV-LMP2基因重组腺病毒疫苗的构建及其诱导CTL应答的初步探讨

• 作者: 周玲 左建民 曾毅 王琦
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: EB病毒 LMP2 重组腺病毒 DC CTL反应
• 年，卷（期）: 2003,（6）
• 所属期刊栏目: 疫苗学
• 页码范围: 446-449
• 页数: 4页
• 分类号: R37
• 字数: 3893字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2003.06.015

摘要

目的构建包含EBV-LMP2基因的重组腺病毒疫苗并探讨它在体内外的免疫性质. 方法采用pAdeasy-1系统构建包含EBV-LMP2基因的重组腺病毒疫苗,并用IFA、PCR和TCID50等方法对其特异性进行鉴定.通过重组腺病毒感染人树突状细胞(DC),在体外活化自体T细胞;以及通过重组腺病毒感染小鼠淋巴细胞,皮下免疫同种小鼠,体内活化CTL评价其免疫效果. 结果通过PCR以及间接免疫荧光试验分别证实了病毒目的基因LMP2的存在以及蛋白在293细胞中的表达.采用TCID50方法,测定第6代的病毒滴度为2×108.体内外的免疫实验结果显示通过这两种方式均可以有效地引发针对EBV-LMP2的CTL反应. 结论包含EBV-LMP2基因的重组腺病毒疫苗可以在体内外有效地引发CTL应答,这些资料为下一步临床应用含LMP2的重组腺病毒作为疫苗治疗和预防EBV相关肿瘤奠定了基础.