次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶突变体的基因构建、表达和性质

• 作者: 曲红 由德林 罗明 邢阳 陈强 顾孝诚
• 来源期刊: 生物化学与生物物理学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶 核苷类似物 定点突变
• 年，卷（期）: 2003,（9）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 853-858
• 页数: 6页
• 分类号: Q5
• 语种: 英文

摘要

通过对我国嗜热菌Thermoanaerobacter tengcongensis中次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)三维结构进行同源模建, 设计出HGPRT的突变体K133A、 K133S和K133T.用抗性筛选法, 对HGPRT的基因进行了定点突变, 并实现了在大肠杆菌中的高效表达.野生型HGPRT及其突变体K133A、 K133S和K133T的催化动力学研究表明, HGPRT突变体改变并扩大了底物专一性, 具有催化嘌呤类似物的活性.