丁酸钠提高重组CHO细胞表达量的研究

• 作者: 俞吉安 张月丽 施泓 汪家愉 顾琪
• 来源期刊: 老年医学与保健
• 学科: 医学
• 关键词: 丁酸类 CHO细胞 重组蛋白质类
• 年，卷（期）: 2003,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 153-154,170
• 页数: 3页
• 分类号: R329.24|R341|R977.6
• 字数: 1764字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-8296.2003.03.009

摘要

目的提高CHO细胞表达外源目标蛋白产量.方法用不同浓度的丁酸钠处理重组CHO细胞,观察细胞数量,细胞形态,表达率,表达量的变化.结果当丁酸钠的浓度为1mM,2mM,5mM时,重组细胞的表达量有不同程度的提高.表达率与丁酸钠的浓度有关,也与丁酸钠加入的时间有关.传代24小时加药的细胞,经2mM,5mM丁酸钠处理后,表达量虽比对照组高,但细胞生长情况不好;传代48小时加药的细胞,经5mM丁酸钠处理后,表达量可提高5倍左右,但细胞数大大减少.当细胞长满瓶后(第7天)加入丁酸钠5mM,加药次日的表达量为对照组(不加药组)的9.5倍.细胞数也有所减少.上述实验表明,由于丁酸钠对细胞生长有抑制作用,表达量虽提高,但细胞数减少,不能达到增产的目的.因此我们设计了用正常培液与丁酸钠交替使用的方法,获得了良好的效果.5mM丁酸钠与正常培液交替处理,在加药后7天内所得的表达物产量为对照组的2.1倍.提高了重组CHO细胞表达目标蛋白的产量.结论丁酸钠的合理使用可提高目标蛋白的产量.