HIV-2 gp105-gag截短体在毕赤酵母中重组表达研究

• 作者: 张应玖 张立树 李子健 江文正 王宏伟 金宁一
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: HIV-2 gp105-gag 毕赤酵母 基因表达
• 年，卷（期）: 2003,（5）
• 所属期刊栏目: 病毒学
• 页码范围: 371-374
• 页数: 4页
• 分类号: R37
• 字数: 2780字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2003.05.019

摘要

目的实现HIV-2ROD gp105-gag截短体重组蛋白tgp105-gag的高效分泌表达,对其表达条件进行研究. 方法用PCR方法获得HIV-2ROD tgp105截短基因,将其与HIV-2ROD gag构建HIV-2ROD tgp105-gag嵌合基因并克隆到毕赤酵母(Pichia pastoris)分泌型表达载体pPIC9中,转化GS115酵母菌,经MD/MM表型筛选、PCR扩增筛选阳性克隆,以甲醇诱导表达后进行SDS-PAGE分析及Western blot证实. 结果 HIV-2ROD tgp105-gag嵌合截短基因在Pichia pastoris酵母系统中获得了有效分泌表达,相对分子质量(Mr)约为140×103,表达量约为16%,表达产物可被HIV-2阳性血清识别.最佳表达条件是大于85%的溶解氧,摇瓶转速240r/min,1.0%～1.5%甲醇诱导,培养时间3?d. 结论在Pichia pastoris表达系统中实现了HIV-2ROD tgp105-gag蛋白的有效分泌性表达,表达产物具有良好的抗原特异性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张应玖	吉林大学生命科学学院	44	194	7.0	11.0
2	李子健		18	79	5.0	7.0