LRP16基因启动子的克隆及荧光素酶报道重组子的构建

• 作者: 于力 卢学春 徐周敏 李续建 楼方定 靳海杰 韩为东
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 生物学
• 关键词: LRP16基因 启动子 pGL3-Basic载体 聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 19-21
• 页数: 3页
• 分类号: Q782
• 字数: 1923字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2003.01.006

摘要

目的:克隆LRP16基因启动子及构建LRP16基因启动子-pGL3-Basic载体.方法:①以LRP16基因全长作为探针,在NCBI的人类基因组数据库中搜索并下载LRP16基因5′端3 kb基因组DNA序列.②以健康献血员基因组DNA为模板进行PCR扩增目的片段,将分离纯化的PCR产物用T4 DNA连接酶与pGEM-T Easy载体相连,转入JM109感受态化大肠杆菌,筛选阳性克隆并测序,进行Kpn Ⅰ和 BamH Ⅰ双酶切和巢式PCR鉴定.③将LRP16启动子-pGEM-T Easy载体再次酶切,纯化回收鉴定过的目的DNA片段,构建LRP16基因启动子-pGL3-Basic载体.结果与结论:长度为2.7 kb的LRP16基因启动子克隆成功,并构建了LRP16基因启动子-pGL3-Basic载体.充分利用因特网上人类基因组数据库的生物信息资源,搜索已知基因的启动子序列,可实现快速、经济和准确地克隆已知基因启动子分子和构建启动子载体的目的.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李续建	解放军总医院血液科	6	90	4.0	6.0
2	于力	解放军总医院血液科	174	1205	17.0	25.0
3	楼方定	解放军总医院血液科	58	526	12.0	20.0
4	韩为东	解放军总医院基础医学所	113	744	13.0	23.0
5	卢学春	解放军总医院血液科	90	756	15.0	21.0
6	徐周敏	解放军总医院血液科	12	126	7.0	11.0
7	靳海杰	解放军总医院血液科	30	125	7.0	9.0