分泌人可溶性FL基因转染细胞及其生物学活性分析

• 作者: 丁天 张学光 徐颖 朱一蓓 沈丽琴 王月丹 许志祥
• 来源期刊: 上海免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Flt3配体(FL) 逆转录病毒载体 ECV304细胞
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 6-9
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11
• 字数: 3259字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-2478.2003.01.002

摘要

应用基因重组技术构建了人可溶性FL基因逆转录病毒载体pLXSN-FL,经转染PA317细胞和G418筛选抗性细胞克隆,获得重组病毒液.NIH3T3细胞进行病毒滴度测定后,选择适当滴度的重组病毒(5×105CFU/m1)感染ECV304细胞;应用聚合酶链反应(PCR)及反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测感染ECV304细胞FL的DNA及mRNA表达;应用ELISA测定rhFL在ECV304中的表达水平,用荧光标记和流式细胞仪检测转基因上清对单个核细胞来源DC的表型影响及3H-TdR掺人法测定DC对T细胞的促增殖作用.结果表明,外源性rhFL基因整合到ECV304细胞染色体DNA并有效地转录和翻译,稳定表达水平为82.4ng(106细胞/24 h)的人FL.转基因ECV细胞培养上清能有效诱导人PBMC来源DC的分化和增强DC对T细胞的激发作用.外源性FL基因可以转移到ECV304细胞并稳定表达,有助于体外研究内皮细胞与免疫细胞的相互作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张学光	苏州大学医学生物技术研究所免疫室	399	1957	18.0	24.0
2	沈丽琴	苏州大学医学生物技术研究所免疫室	33	164	6.0	11.0
3	徐颖	苏州大学医学生物技术研究所免疫室	94	702	11.0	22.0
4	朱一蓓	苏州大学医学生物技术研究所免疫室	40	220	8.0	12.0
5	王月丹	苏州大学医学生物技术研究所免疫室	6	13	1.0	3.0
6	许志祥	苏州大学医学生物技术研究所免疫室	13	68	4.0	8.0
7	丁天	复旦大学生化系	3	14	2.0	3.0