HHV-8 ORF50启动子区序列分离、鉴定及在293细胞中启动活性分析

• 作者: 卢春 徐亚林 曾怡 黄丽
• 来源期刊: 南京医科大学学报(自然科学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 人类疱疹病毒8型 ORF50启动子 启动子活性
• 年，卷（期）: 2003,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 523-526
• 页数: 4页
• 分类号: R373.1+1
• 字数: 3484字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4368.2003.06.001

摘要

目的:分离和鉴定人类疱疹病毒8型(HHV-8)ORF50基因上游启动子区序列,评价其在293细胞中启动活性.方法:以佛波酯(TPA)刺激的BCBL-1细胞总DNA为模板,PCR扩增HHV-8 ORF50启动子区序列,克隆进pGL-3基本载体中虫荧光素酶(Luciferase)报告基因上游多克隆位点,分别构建含正反双向ORF50启动子重组报告质粒,并分别转染293细胞,作Lu-ciferase活性检测,计算相对Luciferase活性单位(RLU).结果:①克隆的HHV-8 ORF50启动子区序列长655碱基(bp),含多个潜在推测AP1、SP1和ERE等转录因子结合序列;②ORF50启动子与正常pGL-3基本载体相比,其RLU增加了26.3倍;③TPA刺激后ORF50启动子与刺激前相比启动活性增加了4.1倍.结论:HHV-8 ORF50启动子区序列在293细胞中具有较强的启动活性;TPA可以作为一有效的阳性对照刺激物用于进一步鉴定ORF50启动子特性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卢春	南京医科大学微生物学与免疫学系	92	236	7.0	9.0
2	曾怡	南京医科大学微生物学与免疫学系	27	93	5.0	6.0
3	黄丽	南京医科大学微生物学与免疫学系	16	79	5.0	7.0
4	徐亚林	南京医科大学微生物学与免疫学系	3	13	3.0	3.0