人U6启动子表达载体的构建及在胃癌细胞中的活性鉴定

• 作者: 于杰 张鹏宇 谭武红 赵璇
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: 人U6启动子 载体构建 胃癌细胞系
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 525-528,571
• 页数: 5页
• 分类号: Q782
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8259.2006.06.002

摘要

目的 构建人U6(hU6)snRNA启动子驱动的小RNA分子的表达载体,并在人胃低分化腺癌SGC-7901细胞中鉴定其表达外源性小RNA分子的活性.方法 以人基因组DNA为模板,用PCR方法扩增hU6 snRNA启动子序列,并将其克隆入PUC19载体中,命名为PUC-hU6-extra,经测序证明其序列的正确性;用脂质体法转染SGC-7901细胞;用RT-PCR检测U6启动子的转录活性,并测定培养细胞的生长曲线.结果 hU6 snRNA基因启动子和紧接转录起始点hU6 snRNA的前27个核苷酸被成功地克隆入PUC19质粒载体,重组载体在SGC-7901细胞中能高表达小分子RNA,并且未观察到后者对细胞体外增殖的影响.结论 成功构建了以hU6 snRNA启动子驱动的、能在人胃低分化腺癌SGC-7901细胞内高效转录小分子RNA的表达质粒PUC-hU6-extra.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	于杰	西安交通大学医学院遗传与分子生物学系	6	23	2.0	4.0
2	谭武红	西安交通大学医学院地方病研究所	24	99	6.0	8.0
3	张鹏宇	西安交通大学医学院遗传与分子生物学系	16	35	4.0	4.0
4	赵璇	西安交通大学医学院组胚学教研室	18	46	3.0	6.0