PCR条件对扩增SARS-CoV多聚酶部分基因的影响

• 作者: 周经姣 张文炳 方丹云 晏辉钧 江丽芳 胡琼 赵卫 龙北国
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 医学
• 关键词: SARS冠状病毒 套式RT-PCR 检测 条件
• 年，卷（期）: 2003,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 11-12
• 页数: 2页
• 分类号: R563.1+903
• 字数: 2687字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2003.06.005

摘要

目的:对该实验室已建立的检测SARS冠状病毒多聚酶基因的套式RT-PCR方法进行优化.方法:从SARS病人的嗽口水标本中提取RNA,调整套式PCR的退火温度,扩增SARS冠状病毒多聚酶部分基因.扩增出的阳性片段连接入pGEM-T载体中,测序后比较其与已知SARS冠状病毒的同源性.结果:通过改变PCR条件,成功从一SARS病人的嗽口水中扩增出SARS冠状病毒多聚酶部分基因.结论:针对不同标本优化PCR反应条件非常重要.