芦荟耐盐差异表达基因文库的构建

• 作者: 万建民 刘兆普 刘玲 孙淑斌 沈其荣
• 来源期刊: 高技术通讯
• 学科: 农学
• 关键词: 芦荟 抑制消减杂交 文库 盐诱导
• 年，卷（期）: 2003,（11）
• 所属期刊栏目: 生物与现代农业技术
• 页码范围: 24-26
• 页数: 3页
• 分类号: S68
• 字数: 2674字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1002-0470.2003.11.006

摘要

为了弄清景天酸植物芦荟的耐盐、耐旱机理,应用抑制性消减杂交技术,构建了库拉索芦荟的盐诱导组织与正常组织差异表达的cDNA消减文库,并做了初步鉴定.分别从库拉索芦荟的正常叶片组织及高盐诱导叶片组织中提取poly(A)+RNA,依次合成单链及双链cDNA,酶切成平均大小为400～600bp的片段;将高盐诱导组织cDNA分为两组,分别与两种不同的接头连接,再与正常组织cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性PCR;获得的产物与T/A载体连接构建cDNA消减文库,并转染大肠杆菌进行文库扩增.经检验证明,构建的cDNA消减文库具有很强的消减效率,非特异性cDNA片段被有效地消减,而特异表达的cDNA得到富集.所构建的库拉索芦荟高盐诱导组织cDNA消减文库为进一步大批量筛选、克隆高盐特异性表达的未知新基因奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈其荣		338	15551	65.0	103.0
2	刘兆普		194	4697	38.0	56.0
3	万建民	南京农业大学水稻所	83	2452	27.0	47.0
4	刘玲		52	1169	19.0	32.0
5	孙淑斌		17	236	8.0	15.0