山羊β-酪蛋白启动子指导的通用表达载体及乳腺暂时表达系统

• 作者: 张守峰 徐青 扈荣良 梁冠生
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 山羊β-酪蛋白启动子 通用表达载体 暂时表达 组织型纤溶酶原激活剂
• 年，卷（期）: 2003,（6）
• 所属期刊栏目: 基础兽医学
• 页码范围: 576-580
• 页数: 5页
• 分类号: Q78|S814.8
• 字数: 5281字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4545.2003.06.020

摘要

为了实现外源蛋白在动物乳腺中的特异性高效表达,利用山羊β-酪蛋白5＇端1.132kb的侧翼调控序列、牛生长激素基因polyA(BGHPA)序列、基质结合区(matrix attachment region,MAR)和多克隆位点(MCS),构建了乳腺组织定位通用表达载体pMRPA,鉴定正确后,将2.1kb的人组织型纤溶酶原激活剂(tissue-type plasminogen activator,tPA)cDNA克隆到pMRPA多克隆位点,获得重组表达载体pMRPA-tPA.在不同的泌乳时间,使用不同的包裹剂,采用不同的剂量,将pMRPA-tPA注入泌乳期山羊乳腺组织进行暂时表达.结果显示,所构建的乳腺组织特异性通用表达载体能够有效地指导目的基因的高效表达.通过乳腺暂时表达试验进一步发现,泌乳稳定期表达效果最好,tPA表达水平在2.020～6.959 mg/L;表达量随DNA用量的增加而提高;使用普通包裹剂和裸质粒相比,普通包裹剂对表达效果无明显影响.本试验对乳腺暂时表达系统进行了系统性研究,为通过乳腺暂时表达系统改良乳汁蛋白组成提供了重要依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张守峰	解放军军需大学军事兽医研究所	29	200	9.0	13.0
2	扈荣良	解放军军需大学军事兽医研究所	49	456	13.0	19.0
3	梁冠生	解放军军需大学军事兽医系	7	44	5.0	6.0
4	徐青	解放军军需大学军事兽医研究所	1	6	1.0	1.0