AchR特异性TsF cDNA文库的构建及筛选

• 作者: 李婉宜 李明远 李虹 肖丽英 蒋中华 龚其美
• 来源期刊: 四川大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: AchR特异性TsF cDNA文库 蛋白免疫印迹法
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 16-19
• 页数: 4页
• 分类号: R746.1
• 字数: 4201字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-173X.2003.01.005

摘要

目的构建AchR特异性TsF cDNA文库并对该文库进行筛选.方法从建立的分泌AchR-TsF的特异性Ts细胞系中直接提取了TsF PolyA+mRNA,反转录合成全长cDNA,以脱磷酸化的λgt11EcoRI臂为载体,体外包装成噬菌体颗粒并转染E.coli Y1090hsdR,得到cDNA文库,并用TCR-α单克隆抗体膜上免疫印迹法对该文库进行筛选.结果重组噬菌体的滴度约为1.4×107 pfu/ml,阳性重组率为86.9%,重组噬菌体DNA的酶切电泳分析证实插入片段大小在0.8～4.0 kb之间.初步筛到27个阳性重组噬菌体,其插入片段大小约为1 kb左右.结论该文库的建立有望获得持续高效表达AchR特异性TsF的重组噬菌体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李虹	四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室	241	1196	15.0	20.0
2	李明远	四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室	80	362	11.0	14.0
3	李婉宜	四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室	43	207	7.0	12.0
4	蒋中华	四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室	15	91	5.0	9.0
5	肖丽英	四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室	23	179	9.0	13.0
6	龚其美	四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室	5	35	2.0	5.0