腺相关病毒介导绿色荧光蛋白基因对体外培养IPE细胞的转染及毒性

• 作者: 孙葆忱 杨晓慧
• 来源期刊: 眼科新进展
• 学科: 医学
• 关键词: 腺相关病毒 绿色荧光蛋白基因 虹膜色素上皮细胞 细胞毒性
• 年，卷（期）: 2003,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 332-334
• 页数: 3页
• 分类号: Q952|R322.9
• 字数: 3254字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-5141.2003.05.008

摘要

目的研究腺相关病毒(recombinant adeno-associatd virus,rAAV)载体介导的绿色荧光蛋白基因(green fluorescent protein,GFP)对体外培养虹膜色素上皮细胞(irispigment epithelial,IPE)的转染和病毒载体对IPE细胞的毒性,为rAAV携带目的基因治疗视网膜色素变性提供理论依据.方法酶辅助的显微分离方法体外培养IPE细胞并鉴定.按转染倍数(multiple of infection,MOI)为103、104、105、106转染已培养3d的传二代IPE细胞,流式细胞仪检测rAAV-GFP对IPE的转染效率.MTT法检测rAAV-GFP对IPE细胞的毒性.结果rAAV-GFP对IPE的转染效率,MOI=103时为26.7%、MOI=104时为53.6%、MOI=105时为60.2%、MOI=106时是63.7%.AAV-GFP转染IPE细胞后,细胞生长正常,MTT法显示各转染组与未转染组的OD值无统计学差异.结论rAAV-GFP对体外培养的IPE细胞转染效率可达60%以上,而且腺相关病毒对细胞生长无明显抑制,腺相关病毒作为视网膜色素变性基因治疗的载体是安全可行的.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙葆忱		13	144	6.0	12.0