分泌表达的抗ErbB2单链抗体与重构型人半胱氨酸蛋白水解酶3融合蛋白对SKBr3细胞的靶向杀伤作用

• 作者: 于翠娟 张立红 曲萍 杨安钢 王成济 董海龙 许彦鸣 贾林涛 赵晶
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肿瘤 基因疗法 基因靶效应
• 年，卷（期）: 2003,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 564-568
• 页数: 5页
• 分类号: R73
• 字数: 3953字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0376-2491.2003.07.011

摘要

目的探讨分泌表达的抗erbB2单链抗体与重构型人半胱氨酸蛋白水解酶(caspase-3)融合蛋白对ErbB2抗原阳性肿瘤细胞的靶向杀伤作用.方法将重构型人caspase-3基因亚克隆入pCMV-e23scFv-PEII-PEIII相应位点,构建表达分泌型的抗erbB2单链抗体与重构型人caspase-3融合蛋白基因的真核表达载体pCMV-e23scFv-PEII-revcasp 3,转染人T淋巴瘤细胞系Jurkat,筛选并建系,ELISA检测培养上清中融合蛋白的分泌表达以及对人乳腺癌细胞SKBr3生长的抑制作用,并将重组质粒经脂质体包裹后肌肉注射荷瘤裸鼠研究其对肿瘤的抑制作用,间接免疫荧光检测重构型人caspase-3蛋白在瘤体的靶向分布.结果融合蛋白基因可通过Jurkat细胞分泌表达并杀伤SKBr3细胞,肌肉注射重组质粒明显延长荷瘤裸鼠生存时间(延长72%)和抑制荷瘤裸鼠肿瘤生长(抑制率为77%).间接免疫荧光染色显示重构型人Caspase-3融合蛋白具有靶向分布. 结论分泌表达的抗erbB2单链抗体与重构型人Caspase-3融合蛋白靶向诱导SKBr3细胞死亡.