重组CD13单链抗体和蝎毒素多肽AGAP融合蛋白真核表达及对NB4细胞的靶向杀伤作用

• 作者: 俞康 倪吴花 吴建波 骆超
• 来源期刊: 中国临床药理学与治疗学
• 关键词: 东亚钳蝎 蝎毒活性肽 抗肿瘤缬精甘肽 CD13单链抗体 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2008,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1231-1236
• 页数: 6页
• 分类号: R730|Q786
• 语种: 中文

摘要

目的:本研究应用基因工程技术方法,构建含重组编码CD13单链抗体和蝎毒素镇痛抗肿瘤缬精甘肽(arialgesic antitumoral peptide,AGAP)融合蛋白基因的表达载体,并研究CD13-AGAP融合蛋白对CD13阳性白血病细胞NB4影响.方法:克隆东亚钳蝎活性肽AGAP的基因,插入真核表达载体pSecTag2/CD13/RFP,得到pSecTag2/CD13/AGAP重组真核表达载体.酶切及测序鉴定后,脂质体介导重组质粒转染293T细胞,通过RT-PCR和免疫印迹方法检测融合基因和蛋白的表达.纯化融合蛋白,作用NB4细胞,CCK8检测细胞活性,流式细胞仪检测细胞周期.结果:酶切及测序结果证实pSecTag/CD13/AGAP重组真核表达载体构建成功,转染293T细胞后,RT-PCR和免疫印迹方法结果证实重组质粒得到有效表达,并纯化真核表达融合蛋白CD13-AGAP对血液肿瘤CD13阳性白血病细胞NB4有一定的生长抑制作用,并且使细胞周期G1期阻滞,S期减少.结论:成功构建了融合蛋白真核表达载体pSecTag2/CD13/AGAP,并在293T细胞中成功表达,进一步证实融合蛋白对CD13阳性白血病细胞NB4有杀伤作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	俞康	温州医学院附属第一医院血液科	113	559	11.0	18.0
2	吴建波	温州医学院附属第一医院医学科学研究所	95	531	13.0	17.0
3	倪吴花	温州医学院附属第一医院医学科学研究所	17	123	6.0	11.0
4	骆超		1	1	1.0	1.0