pcDNA3.1(+)TPA转染人皮肤成纤维细胞的实验研究

• 作者: 周新民 夏家辉 杨进福 胡冬煦 赵迪成 陈勇
• 来源期刊: 中华实用医药杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 组织型纤溶酶原激活因子 基因治疗 pcDNA3.1 皮肤成纤维细胞 缺血性心脏病
• 年，卷（期）: 2003,（13）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1161-1164
• 页数: 4页
• 分类号: R54
• 语种: 中文

摘要

目的建立组织型纤溶酶原激活因子(TPA)基因导入人类细胞并表达外源性TPA产物的方法,为缺血性心脏疾病的基因治疗及防止血管再狭窄提供理论依据和技术指导.方法构建真核表达载体pcDNA3.1(+)TPA,然后将pcDNA3.1(+)TPA转入人皮肤成纤维细胞,并观察外源性TPA表达情况.结果真核表达载体pcDNA3.1(+)TPA在人皮肤成纤维细胞中获有效表达,酶联免疫吸附法TPA蛋白表达定量检测结果为647.8 ng/106细胞/24h,未转pcDNA3.1(+)TPA的皮肤成纤维细胞测得为19.2 ng/106细胞/24h;发色底物法测得外源性TPA活性为125.0 IU/106细胞/24h,未转pcDNA3.1(+)TPA的皮肤成纤维细胞测得为5.8 IU/106细胞/24h.结论 pcDNA3.1(+)TPA转入人皮肤成纤维细胞后,外源性TPA基因获有效表达,为缺血性心脏病的TPA基因治疗提供了理论依据和技术指导.