利用双向电泳比较3种提取户尘螨蛋白的方法

• 作者: 孙劲旅 应万涛 张宏誉 王京兰 钱小红
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: 户尘螨 过敏原 提取 双向电泳
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 321-326
• 页数: 6页
• 分类号: R539.1
• 字数: 4254字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6325.2004.03.019

摘要

为改进户尘螨过敏原提取方法,在采用Cocas液、裂解液及Trizol法提取纯种户尘螨螨体蛋白后,用二喹啉甲酸(BCA)检测法测定蛋白质含量,双向电泳比较上述蛋白提取方法的效果.结果显示,在蛋白质回收率方面,裂解液优于Trizol法优于Cocas液.经过双向电泳,Cocas液提取的蛋白仅仅有少量低分子量的蛋白点;用裂解液提取的蛋白可见明显增多低分子量的蛋白点,但无中分子量的蛋白点;Trizol法提取的蛋白可见中分子量的蛋白点如174～178ku和133.0ku的蛋白质.另外,纯种户尘螨螨体经Trizol液提取后进行双向电泳,在考染和银染时均出现5个高丰度的特殊蛋白点,一个为酸性中分子量蛋白,位置孤立的;另有4个位置彼此非常接近的中性蛋白点.比较后结论为使用Cocas液提取的尘螨蛋白质浓度低,蛋白点少.使用裂解液提取的尘螨蛋白质浓度虽然较高,但是没有中分子量的蛋白点,不能全面反映尘螨的过敏原.使用Trizol法提取的蛋白质浓度中等,有中分子量蛋白点,反映的蛋白点更加全面.纯种户尘螨螨体经Trizol液提取后进行双向电泳,在考染和银染时出现的特征性蛋白点,作为一种双向电泳的指纹图谱,在鉴定此种纯种户尘螨螨体时具有一定的价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	应万涛		8	49	4.0	7.0
2	钱小红		5	45	4.0	5.0
3	王京兰		1	9	1.0	1.0