逆转录病毒载体ex vivo途径表达TH和GDNF基因

• 作者: 吴杰军 徐群渊 杨慧 段德义 蔡青 赵春礼
• 来源期刊: 神经解剖学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 基因治疗 逆转录病毒 酪氨酸羟化酶 胶质源性神经营养因子
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 原著
• 页码范围: 215-219
• 页数: 5页
• 分类号: R33
• 字数: 3855字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-7547.2004.03.001

摘要

为了通过逆转录病毒载体ex vivo途径高效表达TH和GDNF基因.本实验构建有TH和GDNF基因的重组逆转录病毒载体pLHCX/TH和pLNCX2/(DNF,分别转染包装细胞PA317和PT67中;经筛选、RT-PCR、免疫组化等鉴定得到产毒细胞PA317/TH和PT67/GDNF.培养COS 7细胞,以两种产毒细胞的上清分别感染COS-7细胞,筛选后,免疫组化、原位杂交检测基因的表达量,将基因改造的细胞移植到大鼠纹状体内,免疫组化检测体内移植的TH、GDNF基因的表达.结果表明:TH和GDNF基因可在靶细胞表达,且筛选后基因表达阳性细胞显著增加;TH阳性率达50%,GDNF阳性率达70%.在体内实验中,可以观察到这两种外源基因可同时在大鼠脑内移植区表达.以上结果提示,TH和GDNF基因改造细胞,可通过ex vivo途径在脑内移植区高效表达.这一实验结果将对Parkinson病复合性基因治疗提供依据.