小鼠白细胞介素21 cDNA的克隆及真核表达质粒的构建

• 作者: 洪晓武 窦骏 陈国兵 陈峻崧
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 白细胞介素21 RT-PCR 重组质粒
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 49-52
• 页数: 4页
• 分类号: R392.1
• 字数: 3788字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1007-8738.2004.01.014

摘要

目的:克隆小鼠白细胞介素21(IL-21)基因, 构建真核表达质粒, 用以进行肿瘤的基因治疗. 方法:用RT-PCR法, 从ConA活化的小鼠T细胞中扩增IL-21 cDNA, 克隆入哺乳动物细胞高效表达质粒pcDNA3.1中, 构建重组mIL-21真核表达质粒.重组体用载体上的通用引物和PCR下游引物为测序引物, 鉴定克隆的正确性.将已鉴定的重组质粒用脂质体法转染Sp2/0细胞, 用RT-PCR法鉴定转染细胞中IL-21基因的表达, 用MTT比色法检测表达的mIL-21诱导的NK细胞杀伤活性的增强. 结果:正确构建了重组真核表达质粒pcDNA3.1/mIL-21, 并在转染的细胞中检测出IL-21的表达, 表达的mIL-21可在体外增强NK细胞的杀伤活性.结论:成功地构建了重组真核表达质粒pcDNA3.1/mIL-21, 为进一步在肿瘤动物模型中进行IL-21基因治疗及疗效观察奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	窦骏	东南大学医学院病原生物学和免疫学系	69	286	9.0	10.0
2	陈峻崧	东南大学医学院病原生物学和免疫学系	14	76	6.0	8.0
3	陈国兵	东南大学医学院病原生物学和免疫学系	8	50	5.0	7.0
4	洪晓武	东南大学医学院病原生物学和免疫学系	7	50	5.0	7.0