大肠埃希菌O157∶H7的pO157-cured突变株构建

• 作者: 朱淑萍 李蓉
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 大肠埃希菌O157 pO157-cured突变株 质粒不相容性
• 年，卷（期）: 2004,（5）
• 所属期刊栏目: 细菌学
• 页码范围: 365-369
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 3951字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2004.05.011

摘要

目的建立从肠出血性大肠埃希菌O157∶H7中去除pO157的方法,构建pO157-cured突变株(O157Cu).方法分别将mini-R100系质粒pKP2368和mini-F系质粒pIndigoBAC-5通过电穿孔转化入O157∶H7 Sakai、EDL933、85-170、China2364、Arami505和Mida2684菌株中,筛选转化子,进行质粒图谱分析,PCR检测转化子中pKP2368和pIndigoBAC-5基因;并扩增pO157中的复制不相容区incB、incC和incD序列,DNA测序验证PCR结果.结果采用mini-F系质粒pIndigoBAC-5转化,菌株Sakai、EDL933、China2364、Arami505、Mida2684的pO157丢失率(分别为94.44%、52.08%、91.67%、96.67%和63.33%)明显高于采用mini-R100系质粒pKP2368转化时其pO157丢失率(分别为15.22%、9.26%、0、0、0),差异有显著性(P值分别为0.001);对于菌株85-170,无论采用pKP2368还是采用pIndigoBAC-5转化,其pO157丢失率均为0.菌株Sakai、China2364、Arami505、Mida2684的pO157中均含有incB、incC和incD序列,EDL933的pO157中含有incC和incD序列,而85-170的pO157中只含有incC序列.结论用携带与pO157相同活性复制子的R100系质粒pKP2368构建pO157-cured突变株,结果并不理想;但携带RepFIA区、含有incB、incC和incD序列的mini-F系质粒pIndigoBAC-5却适用于构建多种菌株的pO157-cured突变株,成功率高、重复性好.pO157中所含mini-F序列incB、incC和incD的存在情况可能与pO157丢失率有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李蓉	中国疾病预防控制中心营养与食品安全所食源性疾病监控室	14	85	6.0	9.0