含自杀基因酵母菌Fcy::Fur融合基因重组逆转录病毒表达载体的构建与鉴定

• 作者: 刘嘉茵 曾怡 王淑玉 王清 胡卫星 贾雪梅 黄丽
• 来源期刊: 南京医科大学学报(自然科学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 自杀基因 Fcy::Fur 逆转录病毒载体 构建
• 年，卷（期）: 2004,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 150-152
• 页数: 3页
• 分类号: R737.31
• 字数: 2955字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4368.2004.02.019

摘要

目的:构建并鉴定含自杀基因酵母菌Fcy::Fur融合基因的重组逆转录病毒表达载体,拟将用于肿瘤的基因治疗研究.方法:设计一对PCR引物,在引物的5＇端分别引入EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点,以质粒pORF5-Fcy::Fur为模板,采用常规PCR方法扩增Fcy::Fur融合基因,并将其分别克隆进测序载体PCS2+及原核表达载体pGEX-6p-1进一步进行核酸序列测定和原核诱导表达研究.用EcoRⅠ和BamHⅠ将Fcy::Fur融合基因从测序载体上切出,按正确阅读框架克隆进pLXSN中,重组子鉴定采用PCR法和酶切消化.结果:序列测定表明,扩增的基因即为Fcy::Fur序列,Fcy::Fur融合基因在大肠杆菌中获得了融合表达;重组逆转录病毒表达载体经PCR及双酶切鉴定表明:Fcy::Fur以正确方向插入到pLXSN中.结论:成功构建含有自杀基因Fcy::Fur的逆转录病毒表达载体,为进一步进行肿瘤实验性基因治疗奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王淑玉	南京医科大学第一附属医院妇产科	51	247	8.0	11.0
2	刘嘉茵	南京医科大学第一附属医院妇产科	241	1685	19.0	30.0
3	胡卫星	南京医科大学第一附属医院脑外科	57	278	10.0	12.0
4	贾雪梅	南京医科大学第一附属医院妇产科	29	124	6.0	10.0
5	曾怡	南京医科大学微生物学与免疫学系	27	93	5.0	6.0
6	黄丽	南京医科大学微生物学与免疫学系	16	79	5.0	7.0
7	王清	南京医科大学第一附属医院妇产科	68	393	11.0	15.0