日本血吸虫组织蛋白酶L2(SjCL2)基因巴氏毕赤酵母表达载体的构建

• 作者: 何蔼 孟锦绣 张瑞林 易冰 李卓雅 申川军 詹希美 郑小英 雷智刚
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 日本血吸虫 组织蛋白酶L2 基因克隆 巴氏毕赤酵母表达载体
• 年，卷（期）: 2004,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 390-393
• 页数: 4页
• 分类号: R383.2+4
• 字数: 3078字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2004.05.008

摘要

目的扩增SjCL2基因,构建巴氏毕赤酵母表达载体pPICZαB-SjCL2,为进一步研究其蛋白酶的功能奠定基础.方法运用RT-PCR技术,从日本血吸虫(中国大陆株)成虫总RNA中扩增获得SjCL2基因;将其定向克隆至巴氏毕赤酵母表达载体pPICZαB质粒;经KpnⅠ、XbaⅠ双酶切分析和PCR鉴定筛选出阳性克隆,测序分析SjCL2基因并确定其读码框的正确插入.结果利用RT-PCR技术从日本血吸虫成虫总RNA中扩增到约1Kb大小的SjCL2基因,通过双酶切分析、PCR鉴定以及DNA序列分析确定SjCL2基因被克隆到巴氏毕赤酵母表达载体pPICZαB中.结论成功构建了含有SjCL2基因编码区序列的巴氏毕赤酵母表达载体pPICZαB-SjCL2质粒.