片形吸虫"中间型"组织蛋白酶L2基因的原核表达及鉴定

• 作者: 吕庆博 常巧呈 曾敏浩 王春仁 王晓旭 邱鸿宇
• 来源期刊: 黑龙江八一农垦大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 片形吸虫中间型 组织蛋白酶L2 表达分析
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 29-34
• 页数: 6页
• 分类号: R383.24
• 字数: 4318字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2090.2019.06.006

摘要

组织蛋白酶L2(CathepsinL2,CatL2)存在于片形吸虫发育的各个时期,具有潜在的免疫保护性及诊断性.为了获得片形吸虫"中间型"("intermediate form"of Fasciola,Fsp)CatL2基因的重组蛋白,根据GenBank中公布的肝片形吸虫组织蛋白酶L2基因设计特异性引物,应用RT-PCR获得虫体的FspCatL2基因,经TA克隆后,进行测序及生物学分析;进一步构建原核表达重组质粒PET-28a(+)-FspCatL2,在大肠杆菌Rosetta(DE3)中进行诱导表达,将纯化后的蛋白进行SDS-PAGE和Western Blot分析.结果表明扩增得到的FspCatL2基因的大小为933 bp,编码311个氨基酸,生物信息学显示FspCatL2有较多的α-螺旋,具有较好的抗原表位,推测该蛋白应有较好的抗原性.SDS-PAGE结果显示在35 kDa处有目的条带,Western Blot分析发现重组FspCatL2与片形吸虫"中间型"阳性血清发生反应,而与阴性血清不发生反应.实验成功克隆表达了片形吸虫"中间型"组织蛋白酶L2,为进一步研究其功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王春仁	黑龙江八一农垦大学动物科技学院	125	282	7.0	10.0
2	常巧呈	黑龙江八一农垦大学动物科技学院	31	46	4.0	5.0
3	王晓旭	黑龙江八一农垦大学动物科技学院	11	47	4.0	6.0
4	邱鸿宇	黑龙江八一农垦大学动物科技学院	4	1	1.0	1.0
5	吕庆博	黑龙江八一农垦大学动物科技学院	3	0	0.0	0.0
6	曾敏浩	黑龙江八一农垦大学动物科技学院	5	0	0.0	0.0