rhIFN-βla cDNA在CHO细胞上的表达

• 作者: 侯云德 吕宏亮 张成海 李武平 段招军 王刚 衣作安 郑丽舒
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 干扰素 中华仓鼠卵巢细胞 活性
• 年，卷（期）: 2004,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 290-293
• 页数: 4页
• 分类号: R394
• 字数: 4236字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-5503.2004.05.011

摘要

目的在CHO细胞上表达rhIFN-β cDNA.方法利用脂质体技术,将含hIFN-β基因的pRC/CMVIFN β-DNA载体和pSV2dhfr-DNA质粒按3:1的比例转染CHO-k1dbfr-细胞,后者是选择性标记.筛选在缺乏胸腺嘧啶的选择培养基生长的单个细胞克隆,通过MTX加压扩增与dhfr基因共转染IFN β基因.筛选的细胞株通过大规模培养,收集培养液经一系列的步骤纯化.结果能够耐受0.6μmol/L MTX的细胞可产生IFN 105 unit per day/106cells,CHO细胞中表达的hIFN-β纯化后的抗病毒比活性可达2.2×108 IU/mg.结论建立了适合表达人干扰素-β的CHO细胞株.