烟曲霉几丁质酶基因的克隆与表达

• 作者: 余小应 杨寿钧 杨雪鹏 王俊琦 王颖 胡红焱 金城
• 来源期刊: 生物工程学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 烟曲霉(Aspergillus fumigatus),几丁质酶(chitinase),cDNA,表达,稳定性
• 年，卷（期）: 2004,（6）
• 所属期刊栏目: 基因工程
• 页码范围: 843-850
• 页数: 8页
• 分类号: Q786
• 字数: 6062字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3061.2004.06.007

摘要

Chi44是烟曲霉(Aspergillus fumigatus)YJ-407产生的一种胞外几丁质酶.通过用真菌几丁质酶保守氨基酸序列与Chi44的N-端序列检索烟曲霉部分基因组序列数据库,获得一个编号为contig555的烟曲霉基因组序列,可能包含烟曲霉几丁质酶的基因.根据检索结果用RT-PCR方法从烟曲霉YJ-407中克隆到1.4kb的cDNA片段,该cDNA的ORF编码一个395个氨基酸的蛋白,分子量为43.6kD.对其推导氨基酸序列分析表明该蛋白与其它真菌来源的几丁质酶同源,而且活性中心与人巨噬细胞几丁质酶高度同源.该cDNA已在E.coli与Pichia pastorisGS115中获得表达,分别获得43kD和44kD的重组蛋白,两种重组蛋白均有几丁质酶活性.与野生酶相比,大肠杆菌表达的43kD重组酶及Pichia酵母表达的44kD重组酶稳定性下降,说明Chi44的糖基化修饰可稳定酶蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨寿钧	中国科学院微生物研究所微生物资源国家重点实验室	4	48	4.0	4.0
2	王颖	中国科学院微生物研究所微生物资源国家重点实验室	147	1291	18.0	30.0
3	王俊琦	中国科学院微生物研究所微生物资源国家重点实验室	8	57	3.0	7.0
4	胡红焱	中国科学院微生物研究所微生物资源国家重点实验室	1	26	1.0	1.0
5	杨雪鹏	中国科学院微生物研究所微生物资源国家重点实验室	2	36	2.0	2.0
6	余小应	中国科学院微生物研究所微生物资源国家重点实验室	1	26	1.0	1.0
7	金城		1	26	1.0	1.0