嗜水气单胞菌外毒素和外膜蛋白双基因融合表达载体的构建和高效表达

• 作者: 何建国 何鸣筱 叶巧真 谢俊锋 陈诚
• 来源期刊: 水生生物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 嗜水气单胞菌 细胞毒肠毒素基因 外膜蛋白基因 融合基因表达
• 年，卷（期）: 2004,（2）
• 页码范围: 169-173
• 页数: 5页
• 分类号: S941.42
• 字数: 3343字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3207.2004.02.012

摘要

用基因融合方式,以嗜水气单胞菌基因组DNA为模板,设计引物通过聚合酶链式反应(PCR)把去除部分毒性活性编码区的细胞毒肠毒素基因(act)与去除信号肽的外膜蛋白基因(OmpTS)连接一起,两基因之间插入一个linker(Gly4Ser)3经BamHⅠ和HindⅢ双酶切,得到2.1kb的双基因融合片段,克隆于表达质粒pQE-30中,构建了双基因重组表达载体pQE30/act-GS-ompTS,转化大肠杆菌M15(pREP4),经IPTG诱导,表达出预期大小(81.0kD)的融合蛋白Act-GS-OmpTS,此蛋白占菌体总蛋白的42%.Western blot检测结果显示,该蛋白与抗Act兔血清和抗OmpTS兔血清都呈阳性反应,表明融合蛋白保留了外毒素和外膜蛋白的反应原性,为进一步研究此融合蛋白作为疫苗候选成分提供了理论依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何建国	中山大学生命科学学院	127	2323	26.0	41.0
2	叶巧真	中山大学生命科学学院	17	253	10.0	15.0
3	陈诚	中山大学生命科学学院	3	29	2.0	3.0
4	何鸣筱	中山大学生命科学学院	3	55	2.0	3.0
5	谢俊锋	中山大学生命科学学院	2	55	2.0	2.0