电穿孔法基因转染悬浮细胞条件的优化

• 作者: 傅建新 段卫明 沈慧玲 王玮 陈子兴
• 来源期刊: 苏州大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 电穿孔 悬浮细胞 基因转染 优化
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 方法与技术
• 页码范围: 40-43
• 页数: 4页
• 分类号: R733.7
• 字数: 3606字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-0399.2004.01.012

摘要

目的以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因优化悬浮培养的白血病细胞的电穿孔转染条件.方法通过控制电压、电容、细胞状态、温度及缓冲液等转染条件,采用不同条件组合后用电穿孔法将质粒GFP转入悬浮培养的人白血病细胞株K562和NB4,用流式细胞仪和荧光显微镜观察转染率.结果 (1)低电压、高电容能高效转染悬浮培养的人白血病细胞,细胞类型不同条件有所差异,K562细胞在250 V、950 μF得到最大转染率40.6%,NB4细胞在350 V、950 μF得到最大转染率32.9%.(2)良好的细胞生长状态能明显提高转染率.(3)温度和缓冲液中的血清成分对电穿孔效率影响不大.结论电穿孔是一种高效的基因转染法,通过优化其条件,可提高转染率.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈子兴	苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所	103	387	10.0	12.0
2	段卫明	苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所	33	164	8.0	11.0
3	傅建新	苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所	30	157	7.0	11.0
4	王玮	苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所	57	230	9.0	12.0
5	沈慧玲	苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所	11	48	4.0	6.0