电穿孔转染悬浮细胞条件的优化

• 作者: 丁睿 寞科峰 张巍 李艳 蔡磊 赵青川
• 来源期刊: 中国医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 电穿孔转染 悬浮细胞 基因转染 优化
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 459-461
• 页数: 3页
• 分类号: R733.7
• 字数: 2938字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0258-4646.2008.04.009

摘要

目的 以RNA依赖性腺嘌呤脱氮酶(ADAR1)为靶基因优化悬浮培养的小鼠原代淋巴细胞的电穿孔转染条件.方法 通过控制电压、温度、细胞状态等转染条件,采用不同条件组合将靶向ADAR1的sRNA导入悬浮培养的小鼠原代淋巴细胞,用倒置显微镜观察、细胞计数、台盼蓝拒染试验来计算sRNA序列转染率和细胞存活率.结果 小鼠原代淋巴细胞在400 V,40 μs条件下可获得最大转染率,约为30.6;良好的细胞状态以及低温条件可获得更好的转染效果.结论 电穿孔转染法是一种高效的基因转染方法,通过优化其转染条件,可以提高其对悬浮细胞的转染率.