以病毒的230 kb DNA分子为模板的DNA序列测定

• 作者: 朱嘉明 李月琴 王波 谢春芳
• 来源期刊: 暨南大学学报(自然科学与医学版)
• 学科: 生物学
• 关键词: 巨细胞病毒 大片段DNA DNA测序 热循环测序法
• 年，卷（期）: 2004,（2）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 154-158
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 3274字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-9965.2004.02.007

摘要

目的:为确认Tn3-gpt已插入小鼠巨细胞病毒(mouse cytomegalovirus, MCMV)基因组的特定位置,改进大分子病毒DNA的测序方法,建立以230 kb DNA为模板直接进行DNA序列测定的方法.方法:待测MCMV的Tn3-gpt插入突变株感染NIH 3T3细胞后,从培养液中制备病毒颗粒并从中纯化得到基因组DNA,以此DNA为模板,合成的寡核苷酸为引物,用热循环方法按Promega公司的DNA Cycle Sequencing System 试剂盒的方法进行测序.结果:获得纯度较高可直接作为模板进行测序的DNA,测序所得放射自显影图片条带清晰明亮,间隔正常,分辨率较高,可顺利读出插入位点的MCMV的DNA序列,证实Tn3-gpt插入在特定的位置.结论:长达230 kb的大分子病毒DNA可直接作为模板,用热循环测序方法进行测序,无需切割成小片段后才进行测序.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李月琴	暨南大学生物工程学系	81	309	10.0	13.0
2	王波	暨南大学生物工程学系	9	21	3.0	4.0
3	谢春芳	暨南大学生物工程学系	24	202	9.0	13.0
4	朱嘉明	暨南大学生物工程学系	5	47	3.0	5.0