C基因截短型HBV载体的复制、包装与表达

• 作者: 刘超英 吴忆贫 孙殿兴 李娟 胡大荣 胡学玲 范公忍 韩聚强
• 来源期刊: 中华传染病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝炎病毒,乙型 遗传载体 病毒复制 基因表达
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 8-12
• 页数: 5页
• 分类号: R511
• 字数: 3984字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:1000-6680.2004.01.002

摘要

目的探索C基因截短型重组HBV载体的复制、包装和表达.方法采用分子克隆、定点突变技术构建C基因截短型HBV载体;瞬时转染HepG2细胞,在荧光显微镜下观察外源目的基因绿色荧光蛋白(GFP)的表达;提取转染细胞胞内、胞外DNA分别进行半巢式聚合酶链反应(PCR)、非变性凝胶电泳杂交技术、southern blot杂交定量分析及常规PCR等分析,检测重组HBV载体的复制、包装及子代病毒的生成.结果经酶切鉴定,C基因截短型HBV载体构建成功;转染HepG2细胞,外源目的基因能够高效表达;在辅助载体的辅助下,C基因截短型HBV载体能够在肝细胞进行复制,包装,通过定量分析,C基因截短型HBV载体的包装效率比C基因非截短型HBV载体提高4～8倍;另外,C基因截短型HBV载体可以在辅助载体的辅助下包装成携带外源目的基因的子代病毒颗粒分泌到胞外.结论C基因部分截短不影响HBV载体外源基因的表达和病毒的复制,而且可以提高载体的包装效率.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡大荣	北京军区总医院肝病研究所	103	882	15.0	26.0
2	孙殿兴		32	112	5.0	8.0
3	范公忍	北京军区总医院肝病研究所	92	597	12.0	19.0
4	韩聚强	北京军区总医院肝病研究所	68	340	10.0	16.0
5	李娟	北京军区总医院肝病研究所	58	347	10.0	16.0
6	胡学玲	北京军区总医院肝病研究所	39	217	9.0	13.0
7	刘超英	北京军区总医院肝病研究所	21	81	4.0	8.0
8	吴忆贫	北京军区总医院肝病研究所	14	53	4.0	6.0