人鼻咽癌组织定向cDNA文库的构建

• 作者: 何小鹃 李官成 舒峻
• 来源期刊: 中国耳鼻咽喉颅底外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: cDNA文库 定向克隆 鼻咽肿瘤/遗传学
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 200-203
• 页数: 4页
• 分类号: R739.63
• 字数: 3130字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-1520.2004.04.003

摘要

目的快速构建成人鼻咽癌组织cDNA文库.方法从人鼻咽癌组织分离总RNA,以含有sfiIB酶切位点的oligo(dT)引物合成第一链cDNA,以含sfiIA酶切位点的SMART寡核苷酸为引物经LD-PCR扩增双链cDNA,双链cDNA经sfiI(IA & IB)酶切,以CHROMA SPIN-400柱分级分离cDNA,收集符合需要的cDNA片段并纯化,随后将之与λTriplEx2载体连接经体外包装成噬菌体cDNA文库.结果经检测共获得 3.64×106个重组子,重组率＞94%,文库经扩增后滴度为 3.8×109 pfu/ml.结论用SMART方法构建的鼻咽癌组织cDNA文库质量较高,这为以后筛选获取鼻咽癌特异抗原基因或其他相关基因奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李官成	中南大学湘雅医学院肿瘤研究所免疫生物室	65	245	9.0	11.0
2	何小鹃	中南大学湘雅医学院肿瘤研究所免疫生物室	8	58	4.0	7.0
3	舒峻	中南大学湘雅医学院肿瘤研究所免疫生物室	4	21	2.0	4.0