鼠疫耶尔森氏菌荧光标记扩增片段长度多态性分型方法

• 作者: 刘海洪 宋亚军 庞昕 杨瑞馥 王津 翟俊辉 裴德翠 郭兆彪 陈泽良
• 来源期刊: 中国地方病学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: FAFLP 鼠疫耶尔森氏菌 基因分型 聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 检测方法
• 页码范围: 258-261
• 页数: 4页
• 分类号: R37
• 字数: 3448字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1000-4955.2004.03.025

摘要

目的建立荧光标记扩增片段长度多态性(FAFLP)技术平台,探讨鼠疫菌基因分型.方法用5种核酸限制性内切酶消化鼠疫菌基因组DNA,选择最佳内切酶组合,酶切片段经接头连接后,用荧光素标记的5条EcoRⅠ引物和9条MseⅠ引物组成的引物配对扩增,选择最佳引物组合,进行系列PCR条件的优化.扩增产物经ABI PRISM 3100Genetic Analyzer(遗传分析仪)检测,GeneScan等软件进行分析.结果成功建立FAFLP技术平台.结论 FAFLP具有快速、简便、廉价、分辨率高、重复性好和污染少的优点,可用于鼠疫菌的基因分型分析.