截短型人乳头瘤病毒58型L1蛋白的表达及其体外生物活性研究

• 作者: 刘红莉 司履生 李文生 杨军 王一理 郑瑾 陈宏伟
• 来源期刊: 生物工程学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 截短型HPV58 L1蛋白,昆虫-杆状病毒表达系统,蛋白纯化,病毒样颗粒
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 所属期刊栏目: 基因工程
• 页码范围: 536-539
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 3147字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3061.2004.04.012

摘要

利用PCR技术克隆截短型HPV58 L1基因并重组入杆状病毒表达系统穿梭质粒pFastBac-Htb,通过转座反应,将目的基因片段重组入杆状病毒基因组,分离重组的Bacmid DNA, 并转染Sf-9昆虫细胞,收集被转染的Sf-9细胞,提取细胞蛋白,SDS-PAGE检测可见在大约58Kda处出现一新生蛋白条带,Western blot 证实为HPV58L1蛋白.用ProBondTM纯化系统纯化所表达的蛋白.小鼠红细胞凝集试验证实纯化的蛋白可介导小鼠红细胞凝集,透射电镜观察证实纯化蛋白可自组装成VLP.结果表明昆虫杆状病毒表达系统可高效表达截短型HPV58L1蛋白,纯化后的截短型HPV58 L1蛋白在体外可自组装VLP,并具有介导小鼠红细胞凝集的生物学活性.