人乳头瘤病毒16型L1的表达、病毒样颗粒组装及其免疫原性研究

• 作者: 刘微 王会岩 纪莉婷 谢文静 郭明旸 韩亚如
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 人乳头瘤病毒 宫颈癌 病毒样颗粒 原核表达
• 年，卷（期）: 2018,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 684-688
• 页数: 5页
• 分类号: R373.9
• 字数: 4214字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2018.00.123

摘要

目的 在原核表达系统中表达HPV16 L1蛋白,纯化后在体外自组装成VLPs并鉴定.方法 优化GenBank中HPV16 L1基因序列并截短C末端25个氨基酸,构建至原核表达载体pET-28a上,获得重组表达载体pET28a-16L1△C25.采用镍亲和层析法纯化超声上清,于体外解组装-重组装HPV16 VLPs,采用动态光散射和透射电镜进行形貌分析,纯化后于第0、2和4周免疫小鼠,假病毒中和试验检测HPV16 VLPs免疫后血清中和抗体.结果 双酶切和测序结果表明成功构建pET28a-16L1△C25重组质粒,诱导表达后,经SDS-PAGE和Western blotting分析显示表达的L1蛋白大部分以可溶性形式存在,纯化后的蛋白样品于体外重新组装,动态光散射和透射电镜能够观察到形态与天然病毒颗粒相似的VLPs,第6周小鼠血清中和抗体滴度Log10平均值达到4.43.结论 利用原核表达系统成功表达了截短型HPV16 L1蛋白,并于体外组装成结构完整的VLPs,且具有较好的免疫原性,为低成本HPV预防性疫苗的研发奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王会岩	吉林医药学院检验学院	49	47	4.0	5.0
2	刘微	吉林医药学院检验学院	19	58	4.0	7.0
3	韩亚如	吉林医药学院检验学院	2	2	1.0	1.0
4	谢文静	吉林医药学院检验学院	2	2	1.0	1.0
5	郭明旸	吉林医药学院检验学院	1	2	1.0	1.0
6	纪莉婷	吉林医药学院检验学院	1	2	1.0	1.0