一种同时分离肝细胞和储脂细胞的简易方法

• 作者: 于聪慧 吕民生 姚军波 杨荣华 林梅
• 来源期刊: 中华实验外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 分离方法 肝细胞 储脂细胞
• 年，卷（期）: 2004,（10）
• 所属期刊栏目: 肝脏外科
• 页码范围: 1179-1180
• 页数: 2页
• 分类号: R3
• 字数: 2224字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:1001-9030.2004.10.010

摘要

目的探讨同时分离肝细胞和储脂细胞的有效方法.方法采用门静脉胶原酶灌注消化法同时分离大鼠肝细胞和储脂细胞,先用300r/min(20℃)低速离心5 min,将细胞悬液分成上清和沉淀两部分并分别放入两个离心管中.A管为沉淀部分(肝细胞悬液)经0.02%胶原酶孵育液孵育10min(37℃ 5%CO2),100目网过滤,离心后即为肝细胞.B管为上清部分主要是储脂细胞,经胶原酶恒温震荡消化(200r/min,37℃),200目网过滤,Nycodenz液进行梯度离心(3 000r/min)后即得储脂细胞.结果肝细胞存活率和细胞产率分别为 (93.5± 3.5)%和 (2.4± 0.2)×108/大鼠,储脂细胞分别为 (94.5± 3.5)%和 (2.3± 0.4)×107/大鼠.肝细胞组织学及组织化学检测肝细胞形态正常,细胞培养功能表达正常.储脂细胞在激发波长为328 nm的荧光显微镜下发出蓝绿色荧光,细胞培养贴壁良好.结论一步法同时分离肝细胞和储脂细胞是一种简单有效的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨荣华	北京军区总医院肝胆外科	41	184	7.0	11.0
2	吕民生	北京军区总医院肝胆外科	23	91	6.0	9.0
3	于聪慧	北京军区总医院肝胆外科	91	378	11.0	15.0
4	姚军波	北京军区总医院肝胆外科	34	191	7.0	13.0
5	林梅	北京军区总医院肝胆外科	6	32	3.0	5.0