摘要:
目的探讨针刺体壁对丝光绿蝇抗菌物质的诱导表达,并研究丝光绿蝇免疫血淋巴的性质.方法丝光绿蝇3龄幼虫针刺体壁处理后,分别于第0、12、24、36、48、60、72、84h提取血淋巴,以金黄葡萄球菌为指示菌,采用平板滤纸片法作抑菌试验,用于显示丝光绿蝇抗菌物质的诱导表达,以抑菌圈直径表示抑菌活力的大小.提取诱导后48h的血淋巴,设置3μl、5μl、7μl不同的血淋巴加样量实验组,记录不同加样量对金黄葡萄球菌的的抑菌效果;设置不同稀释浓度,记录不同浓度的血淋巴对金黄葡萄球菌的抑菌活力.诱导后48h的血淋巴置于冰箱保存后,设置36℃和100℃不同解冻温度,观察不同温度解冻的血淋巴对金黄葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌效果.诱导后48h的血淋巴,100℃水浴3min,观察其对金黄葡萄球菌的抑菌活力.提取诱导后48h的血淋巴,观察其对大肠杆菌、金黄葡萄球菌、白色葡萄球菌、变形杆菌、伤寒杆菌、副伤寒杆菌、枯草杆菌、溶壁微球菌等8种细菌的抑菌效果.结果丝光绿蝇幼虫针刺体壁处理后,对金黄葡萄球菌的抑菌活力高峰出现在处理后48h.平板滤纸片法抑菌试验中,以加7μl血淋巴的抑菌效果最佳.诱导后48h的血淋巴置于冰箱保存后,36℃和100℃不同温度解冻,对金黄葡萄球菌和大肠杆菌均有抑菌效果,36℃解冻效果好于100℃.诱导后48h的血淋巴,100℃水浴3min,对金黄葡萄球菌仍有抑菌活力.丝光绿蝇诱导48h血淋巴1/2、1/4、1/8、1/16、1/32、1/64的不同稀释浓度,对金黄葡萄球菌均能产生明显的抑菌环.丝光绿蝇诱导后48h的血淋巴,对大肠杆菌、金黄葡萄球菌、白色葡萄球菌、变形杆菌、伤寒杆菌、副伤寒杆菌、枯草杆菌、溶壁微球菌等8种细菌都能产生明显的抑菌环.结论针刺体壁能诱导丝光绿蝇体内产生抗菌物质,诱导的抑菌活力峰出现在处理后48h,丝光绿蝇的血淋巴在诱导后48h提取为宜,抑菌试验加样以7μl为宜.丝光绿蝇诱导后48h的血淋巴,稀释至64倍,对金黄葡萄球菌仍有抗菌活性;36℃解冻效果好于100℃;抑菌活力具有一定的热稳定性;具有较广的抗菌活性.