双阳型梅花鹿脾脏细胞cDNA文库的构建和四个EST的发现

• 作者: 于永利 卫红飞 杨煜 王莉 陈越
• 来源期刊: 吉林大学学报(医学版)
• 学科: 生物学
• 关键词: 基因文库 表达的序列标记 梅花鹿
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 325-328
• 页数: 4页
• 分类号: Q785
• 字数: 3238字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-587X.2004.03.001

摘要

目的:开发和利用中国梅花鹿的基因资源,以期拥有一批梅花鹿基因的专利,并在专利保护下生产具有自己知识产权的基因工程药物.方法:用Trizol试剂提取梅花鹿脾脏细胞中的总RNA,分离得到mRNA后,用逆转录方法合成与mRNA互补的cDNA单链,再以此cDNA单链为模板,得到与该cDNA互补的另一条DNA链,将得到的DNA双链分子通过合适的Adapter连入pSPORT1质粒,将此重组质粒通过电转化方法导入E.coliDH5α菌,得到脾脏细胞的cDNA文库.筛选出阳性重组子,测序并分析得到的ESTs序列.结果:成功地构建了双阳型梅花鹿脾脏细胞cDNA文库;并对部分库容cDNA进行了克隆和测序,在这一过程中发现4个与已知基因同源的表达序列标签(ESTs),其中2个EST分别是梅花鹿视网膜母细胞瘤的同源基因和梅花鹿维生素K依赖性蛋白前体cDNA的部分序列.结论:通过构建cDNA文库的方法成功地得到了一批有价值的梅花鹿的基因片段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	于永利	吉林大学基础医学院免疫学教研室	86	281	8.0	12.0
2	王莉	吉林大学基础医学院免疫学教研室	90	378	11.0	16.0
3	陈越	吉林大学生命科学学院	9	24	3.0	4.0
4	卫红飞	吉林大学基础医学院分子生物学教研室	19	87	6.0	8.0
5	杨煜	吉林大学基础医学院免疫学教研室	39	240	6.0	14.0