抗HIF-1αmRNA锤头状核酶设计及其基因克隆

• 作者: 吴永平 李婷
• 来源期刊: 徐州医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 锤头状核酶 缺氧诱导因子-1α 基因治疗
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 所属期刊栏目: 分子生物学
• 页码范围: 301-304
• 页数: 4页
• 分类号: R730
• 字数: 2326字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2065.2004.04.007

摘要

目的设计一个抗缺氧诱导因子1α(HIF-1α)mRNA的锤头状核酶,并构建它的基因表达载体,以便用于肿瘤的基因治疗.方法用RNA结构分析软件预测HIF-1α mRNA的二级结构并选择合适的核酶作用靶点,以选定的靶点设计相应的锤头状核酶,合成编码核酶的DNA并克隆到载体pSP72上,酶切及DNA测序鉴定核酶序列.结果HIF-1α mRNA的72位含有GUC三联体,可以作为核酶的切割靶点,设计的核酶包括22nt的催化活性中心和16 nt的侧翼序列.计算机辅助预测证明此位点为合适的靶点,限制性内切酶和DNA测序证实核酶基因正确插入载体pSP72上.结论成功设计并构建抗HIF-1α mRNA锤头状核酶基因表达载体,为进一步运用核酶切割HIF-1αmRNA基因,从而抑制肿瘤生长提供了必要条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴永平	徐州医学院病理学教研室	56	299	7.0	14.0
2	李婷	徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心	9	37	3.0	6.0