西尼罗病毒RT-PCR检测方法的建立及其初步应用

• 作者: 司炳银 左曙青 张久松 张泮河 曹务春
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 西尼罗病毒 RT-PCR
• 年，卷（期）: 2004,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 737-740
• 页数: 4页
• 分类号: R373.9
• 字数: 3611字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2004.09.002

摘要

目的建立西尼罗病毒(West Nile virus, WNV)RT-PCR检测方法,为WNV感染的诊断和流行病学调查奠定基础.方法选择Vero-E6细胞进行WNV培养,通过乳鼠脑内接种病毒培养液获得WNV感染脑组织.在病毒基因组E区和C区设计3对引物,以WNV培养液,建立并优化病毒核酸RT-PCR分析方法.然后,以此对感染蚊虫模拟标本和乳鼠脑组织进行检测.PCR产物测序后,用Blast进行同源性分析.结果用RT-PCR在WNV培养液中扩增出与预期大小一致的核苷酸片段,并通过改变循环数,模板稀释倍数等参数对该方法进行了优化;将建立的方法用于检测感染蚊虫模拟标本和感染乳鼠脑组织,均检测出WNV目的基因片段,且扩增效果与病毒培养液无明显差异;套式PCR能显著提高检测的敏感性(108-109倍).结论本研究建立的WNV RT-PCR检测方法具有较高的敏感性,可用于WNV感染的流行病学调查研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	司炳银	军事医学科学院微生物流行病研究所	19	108	6.0	9.0
2	张泮河	军事医学科学院微生物流行病研究所	31	283	11.0	15.0
3	左曙青	军事医学科学院微生物流行病研究所	9	36	4.0	5.0
4	曹务春	军事医学科学院微生物流行病研究所	72	718	15.0	22.0
5	张久松	军事医学科学院微生物流行病研究所	10	76	5.0	8.0