多重RT-PCR同步检测A组轮状病毒P基因型

• 作者: 叶临湘 周敦金 唐少文 杨继红 王斌
• 来源期刊: 中国公共卫生
• 学科: 医学
• 关键词: 多重RT-PCR 轮状病毒 P型基因型
• 年，卷（期）: 2004,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 932-934
• 页数: 3页
• 分类号: R730.44
• 字数: 4364字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1001-0580.2004.08.016

摘要

目的建立A组轮状病毒VP4基因型的多重PCR分型方法,并用此方法对武汉地区婴幼儿腹泻样本进行检测.方法在分析A组轮状病毒VP4基因的基础上,选取引物con2、con3进行第一轮RT-PCR,然后以A组轮状病毒5个P基因型P[6]、P[8]、P[9]、P[4]和P[10]的特异性引物,进行第二轮巢式PCR,建立多重巢式RT-PCR同步检测A组轮状病毒P基因型技术.结果利用该方法可以同时检出5种不同基因型标准株混合物中的各个型别.将纯化的A组轮状病毒标准株RNA系列稀释后,用本方法进行检测,其灵敏度为0.1 ng/μl.同时还对40份从武汉市儿童医院采集的A组轮状病毒阳性的腹泻儿童大便样本进行检测,其中P[8]有29例、P[4]有5例,另外发现有P[8]与P[4]混合感染4例.说明该方法对实际样本中的混合感染也能很好地分型.结论应用多重巢式RT-PCR对A组轮状病毒基因型研究将为临床诊断和实验研究提供一种快速、灵敏和特异的检测手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	叶临湘	华中科技大学同济医学院流行病学教研室	58	614	13.0	22.0
2	唐少文		6	19	3.0	4.0
4	周敦金		20	302	12.0	17.0
5	王斌		9	66	4.0	8.0
8	杨继红		2	26	1.0	2.0