HCV包膜糖蛋白E2基因的克隆、蛋白表达及纯化

• 作者: 刘秋平 周永兴 杜德伟 秦鸿雁 贾战生 韩骅
• 来源期刊: 世界华人消化杂志
• 学科: 医学
• 年，卷（期）: 2004,（2）
• 所属期刊栏目: 病毒性肝炎
• 页码范围: 315-318
• 页数: 4页
• 分类号: R5
• 字数: 3815字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-3079.2004.02.015

摘要

目的:获得大量重组HCVE2蛋白,为研究E 2蛋白的功能及制备其抗体奠定基础.方法:利用PCR方法从HCV基因组序列中扩增出831 bp(384-661 aa)的E2基因片段并按读框克隆到原核表达载体pET32a(+)上,得到重组质粒pET32a-HCVE2,转化大肠杆菌BL-21(DE3)菌株,IPTG诱导HCV E2蛋白表达,SDS-PAGE和western blot检测蛋白表达,Ni-NTA偶联的琼脂糖黏附柱纯化融合蛋白.结果:经IPTG诱导后,可见分子量约55 000的融合蛋白表达;表达的蛋白主要以包涵体形式存在;经Ni-NTA偶联的琼脂糖黏附柱纯化的融合蛋白与抗His抗体及HCV阳性血清具有良好的反应原性.结论:HCV E2基因的克隆、表达及其融合蛋白的纯化为进一步开展HCV E2蛋白功能和HCV受体的研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	秦鸿雁	中国人民解放军第四军医大学基础部医学遗传学与发育生物学教研室	3	14	2.0	3.0
2	周永兴	中国人民解放军第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心	27	310	11.0	16.0
3	贾战生	中国人民解放军第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心	7	25	3.0	4.0
4	杜德伟	中国人民解放军第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心	3	42	2.0	3.0
5	刘秋平	中国人民解放军第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心	2	7	2.0	2.0