VEGF165在哺乳动物细胞中的稳定表达

• 作者: 卿志荣 唐浩 夏昆 文娟 杨进福 胡冬煦 赵天力 陈勇
• 来源期刊: 中国医师杂志
• 学科: 医学
• 关键词: VEGF165 CHO细胞 转基因 基因表达
• 年，卷（期）: 2004,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 868-871
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3350字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1008-1372.2004.07.002

摘要

目的探讨pcDNA3.1-VEGF165质粒对哺乳动物细胞的表达和转染.方法将pcDNA3.1-VEGF165质粒用电转的方法导入CHO细胞中,G418筛选细胞克隆.通过RT-PCR、ELISA、Westen-blot在转录水平和蛋白质水平上检测VEGF165在转基因CHO细胞中的表达.通过内皮细胞增殖实验和血管通透性实验检测所表达的VEGF165的生物学活性.结果获得有G418抗性的CHO细胞克隆.RT-PCR扩增出一条大小约600bp的特异性泳带,测序结果与VEGF165 mRNA一致.ELISA显示细胞培养上清的VEGF浓度约为10～20ng/ml.WESTEN-BLOT检测到大小为23KD的特异性蛋白质条带.内皮细胞增殖实验显示细胞培养上清具有促内皮细胞增殖作用.血管通透性实验显示细胞培养上清明显增加毛细血管通透性.结论 pcDNA3.1-VEGF165质粒真核表达系统能在哺乳动物细胞中表达具有良好生物学活性的VEGF165蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	唐浩	中南大学湘雅二医院胸心外科	25	84	6.0	7.0
2	杨进福	中南大学湘雅二医院胸心外科	85	486	10.0	17.0
3	赵天力	中南大学湘雅二医院胸心外科	32	204	6.0	13.0
4	胡冬煦	中南大学湘雅二医院胸心外科	57	247	8.0	12.0
5	陈勇		2	5	1.0	2.0
6	夏昆		3	17	2.0	3.0
7	文娟		2	5	1.0	2.0
8	卿志荣		2	5	1.0	2.0