羧肽酶A1及其活性中心基因的表达及活性分析

• 作者: 岳乔红 杨柳 苏明权 郝晓柯
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 羧肽酶A1 活性中心 原核表达 活性分析
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 206-210
• 页数: 5页
• 分类号: R392.11
• 字数: 3431字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2005.03.010

摘要

目的:克隆羧肽酶A1(carboxypeptidase A1,CPA1)全酶及其活性中心基因,构建重组表达载体进行诱导表达,分析表达产物活性.方法:RT-PCR扩增CPA1全酶及活性中心基因,测序分析后将目的基因克隆于表达载体pGEX-4T-1,测序证实插入方向正确后转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达目的基因后SDS-PAGE电泳分析.目的蛋白经变性、复性、纯化后MTT法和集落形成试验鉴定其活性.结果:获得了人CPA1全酶及活性中心基因,目的基因诱导表达后约66 kD及46 kD处可见新生蛋白带;活性分析显示CPA1全酶和活性中心蛋白都具有一定的催化水解活性,但后者对肿瘤细胞的杀伤效果较弱.结论:能成功克隆了人CPA1全酶及其活性中心基因,获得了二者的原核表达产物,体外具有一定活性.可望以人羧肽酶A1全酶及其活性中心基因为新起点,继续完善优化羧肽酶A1系统,为抗体靶向治疗前列腺癌的临床应用奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郝晓柯	第四军医大学西京医院检验科	322	1751	18.0	23.0
2	苏明权	第四军医大学西京医院检验科	226	1052	14.0	20.0
3	岳乔红	第四军医大学西京医院检验科	71	374	10.0	15.0
4	杨柳	第四军医大学西京医院检验科	99	517	12.0	17.0