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摘要:
目的:构建人多药耐药基因(MDR1)的真核表达载体,转染CHO细胞,研究MDR1基因在真核细胞中的表达及功能.方法:将MDR1全长基因克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+),利用阳离子脂质体转染CHO细胞,RT-PCR检测MDR1转染阳性细胞,并用G418筛选稳定表达MDR1基因的细胞,通过测定细胞对Rh123的外排作用以及对阿霉素的耐受性确定MDR1基因在正常细胞中的功能.结果:酶切鉴定和测序结果证明构建的重组表达载体pcDNA-MDR1序列正确.RT-PCR分析以及荧光显微镜观察结果表明:该重组表达载体已在CHO细胞中有效转录并稳定表达.Rh123外排和MTT药敏实验结果显示:转染pcDNA-MDR1的CHO细胞对Rh123外排作用显著高于未转染的CHO细胞,并且转染后的CHO细胞对阿霉素的耐药性也有显著提高.结论:成功构建了稳定表达MDR1并具有多药耐药功能的细胞株,有望成为多药耐药性药物研究的细胞模型.
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文献信息
篇名 人多药耐药基因1在CHO细胞中的表达及功能研究
来源期刊 中国药科大学学报 学科 生物学
关键词 MDR1基因 多药耐药 CHO细胞
年,卷(期) 2005,(6) 所属期刊栏目 论文
研究方向 页码范围 594-598
页数 5页 分类号 Q786
字数 3053字 语种 中文
DOI 10.3321/j.issn:1000-5048.2005.06.026
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 奚涛 中国药科大学生命科学与技术学院 138 927 15.0 25.0
2 罗学刚 中国药科大学生命科学与技术学院 12 81 4.0 9.0
3 林超 中国药科大学生命科学与技术学院 3 13 2.0 3.0
4 辛中帅 中国药科大学生命科学与技术学院 1 1 1.0 1.0
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CHO细胞
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