鸡柔嫩艾美尔球虫第二代裂殖子表面抗原MZ5-7基因的克隆、表位分析及原核表达

• 作者: 严若峰 徐立新 李祥瑞 格日勒图
• 来源期刊: 寄生虫与医学昆虫学报
• 学科: 农学
• 关键词: 柔嫩艾美尔球虫 MZ5-7基因 原核表达 鸡
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 著述
• 页码范围: 193-198
• 页数: 6页
• 分类号: S8
• 字数: 4992字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-0507.2005.04.001

摘要

用RT-PCR的方法,从感染柔嫩艾美尔球虫(Eimeria tenella)第5天的鸡盲肠分离的第二代裂殖子中克隆出MZ5-7基因,并进行抗原表位分析和原核表达,结果表明,MZ5-7基因ORF为945 bp,与GenBank里已知序列(登录号为L08257)比较核甘酸和氨基酸同源性均为99.9%.应用DNAStar软件对该基因的抗原表位进行了分析,发现其B细胞表位广泛分布在80～300区域,其中80～130区域、190～220区域和300～320区域更为突出,而T细胞基序则集中在123～190区域和220～300区域.根据MZ5-7基因序列重新设计一对引物,PCR方法扩增出不含信号肽长度为885 bp的基因序列,克隆到pET28b获得重组质粒pET28b-MZ亚,转入宿主菌BL21中,用IPTG进行诱导表达,表达的融合蛋白约36.5 kDa 10-pound note,符合目的蛋白大小;同时应用Western blot方法与抗第二代裂殖子和子孢子的2种高免血清反应,结果表明抗裂殖子和子孢子血清均能识别MZP(裂殖子蛋白,MZP,merozoite protein).

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李祥瑞	南京农业大学动物医学院	126	1418	20.0	33.0
2	徐立新	南京农业大学动物医学院	57	304	11.0	14.0
3	严若峰	南京农业大学动物医学院	53	256	10.0	13.0
4	格日勒图	南京农业大学动物医学院	3	19	3.0	3.0