柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子表面抗原基因(λMZ5-7) 在大肠杆菌中的表达

• 作者: 韩红玉 黄兵
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 农学
• 关键词: 柔嫩艾美耳球虫 第二代裂殖子 表达
• 年，卷（期）: 2001,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 34-37
• 页数: 4页
• 分类号: S85
• 字数: 3395字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-5464.2001.06.008

摘要

将重组克隆质粒(PGEM-λMZ)用EcoR I酶切后,电泳回收目的片段,克隆到经EcoR I酶切、CIAP处理的表达载体pET-28a中,转化大肠杆菌JM109感受态细胞,得到的转化子经PCR鉴定和酶切分析,筛选出符合正确阅读框的重组子,构建成重组表达质粒(PET-λMZ),并在大肠杆菌BL21(DE3)表达菌中成功地表达了含目的蛋白的融合蛋白,融合蛋白的分子量约34KDa,加入IPTG诱导6h后,蛋白表达接近最高水平.表达产物经Ni-NTA亲和层析柱纯化,SDS-PAGE检测为单一条带.经Western-blotting杂交实验,纯化出的目的蛋白能与兔抗E.tenella第二代裂殖子抗血清发生反应,说明MZP蛋白是E.tenella第二代裂殖子抗原蛋白,具有一定的免疫原性,为进一步研究重组疫苗创造了一定的条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄兵	中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所农业部动物寄生虫学重点实验室	43	485	12.0	20.0
2	韩红玉	中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所农业部动物寄生虫学重点实验室	17	147	6.0	12.0