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摘要:
目的建立适用于检测人用猪源性生物制品中外源性乙脑病毒(JEV)的嵌套式RT-PCR方法.方法根据已公布的JEV序列 (GenBank登录号为M55506),设计合成两对引物,对JEV感染的乳鼠脑组织和培养JEV的BHK-21细胞抽提RNA进行RT-PCR和RT-nested PCR,将PCR产物进行了克隆测序;同时对猪细小病毒(PPV)、猴空泡病毒40 (SV40)及正常乳鼠脑组织、正常BHK-21细胞、PK15细胞、BSC-1细胞提取核酸进行PCR,并对210份临床样品进行了检测.结果 PCR产物经琼脂糖凝胶电泳检测,JEV感染的乳鼠脑组织和培养JEV的BHK-21细胞均扩增出1 015 bp和622 bp目的基因片段,而PPV、SV40及未感染JEV的乳鼠脑组织、正常BHK-21细胞、PK15细胞、BSC-1细胞均未见特异性扩增条带,210份猪组织样品中未检出阳性样品.RT-nested PCR检测的最低限度为10 PFU病毒.从样品核酸的提取到PCR扩增及检测结果的报告可在8小时内完成.结论本研究建立的RT-Nested PCR方法具有快速、特异、敏感、可靠的特点,可用于人用猪源性生物制品中外源性JEV的污染检测.
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内容分析
关键词云
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文献信息
篇名 乙脑病毒嵌套式RT-PCR检测方法的建立及初步应用
来源期刊 中国人兽共患病杂志 学科 医学
关键词 乙脑病毒 反转录-嵌套式聚合酶链反应 检测
年,卷(期) 2005,(4) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 279-282
页数 4页 分类号 R373.3
字数 3305字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1002-2694.2005.04.003
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 卫礼 10 96 5.0 9.0
2 贺争鸣 122 809 15.0 21.0
3 邢瑞昌 56 497 13.0 19.0
4 高正琴 22 124 6.0 10.0
5 王吉 4 52 3.0 4.0
传播情况
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研究主题发展历程
节点文献
乙脑病毒
反转录-嵌套式聚合酶链反应
检测
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国人兽共患病学报
月刊
1002-2694
35-1284/R
大16开
福建省福州市津泰路76号
34-46
1985
chi
出版文献量(篇)
6893
总下载数(次)
10
总被引数(次)
38474
相关基金
国家高技术研究发展计划(863计划)
英文译名:The National High Technology Research and Development Program of China
官方网址:http://www.863.org.cn
项目类型:重点项目
学科类型:信息技术
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